研究背景:随着全球人口的增长和人均收入的增加,人类饮食中蛋白质的比例也在不断增加。然而,地球上的土地、水资源等有限,限制了高质量蛋白质的生产,导致蛋白质供需失衡。当前,蛋白质来源主要依赖动物和植物,其中动物源蛋白质占人类蛋白质消费的40%。卵清蛋白是鸡蛋白中最丰富的成分,其氨基酸比例与人类蛋白质一致,是一种高质量蛋白质。但依赖动物蛋白质存在环境影响、能量损失和安全问题等挑战,因此需要探索可持续的蛋白质来源。
研究问题:主要围绕以下两个问题展开:
o 如何通过启动子工程优化酿酒酵母中卵清蛋白的表达水平?
o 如何构建具有不同强度和稳定表达水平的短合成启动子库?
研究结果:
· 筛选内源性启动子:研究者首先筛选了93个内源性启动子,并通过荧光表征系统鉴定了14个核心启动子。这些核心启动子具有不同的强度和表达稳定性,为后续构建短合成启动子提供了基础。
· 构建短合成启动子库:研究者将筛选出的核心启动子与不同的上游激活序列(UASs)结合,构建了56个长度小于500 bp的短启动子库。这些短启动子具有不同的强度和表达水平,满足了优化卵清蛋白表达水平的需求。
· 优化卵清蛋白表达:使用构建的短启动子优化了卵清蛋白的表达。实验结果表明,最强的短启动子比常用的强组成型启动子PTDH3活性高30%,尽管长度只有其三分之一。同时,荧光强度也超过了内源性启动子,说明短合成启动子在优化卵清蛋白表达方面具有显著优势。
研究意义:通过构建短合成启动子以优化酿酒酵母中卵清蛋白的表达水平,取得了显著的成果。这些成果不仅解决了当前蛋白质生产面临的挑战,还为未来的蛋白质生产提供了新的策略和工具。同时,本研究还推动了合成生物学的发展,为可持续发展做出了贡献。
文献来源: Lin, Ying, et al. "Construction of short synthetic promoters for optimization of ovalbumin expression level in Saccharomyces cerevisiae." Systems Microbiology and Biomanufacturing (2024): 1-10.